Otimização de protocolos de extração de RNA em diferentes tecidos de milho.

• Autor(a) principal: PORTO, B. N.
• Data de Publicação: 2010
• Outros Autores: MAGALHAES, P. C., CAMPOS, N. A., ALVES, J. D., MAGALHÃES, M. M.
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da EMBRAPA (Repository Open Access to Scientific Information from EMBRAPA - Alice)
• Texto Completo: http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/895835; http://dx.doi.org/10.18512/1980-6477/rbms.v9n2p189-200
• topic: Zea mays; Ácido nucleico; Raiz; Nucleic acids; Roots

Neste trabalho, foram testados cinco métodos de extração de RNA (CTAB microextração, Concert? Invitrogen, Concert? Adaptado, TRI Reagente® Sigma e TRI Reagente® Adaptado), em dois diferentes tecidos de milho (mesocótilo e raiz), com o objetivo de estabelecer um método eficiente de extração de RNA, visando posteriormente estudos de expressão gênica. Observou-se que o método Concert,utilizando o protocolo adaptado, foi o mais eficiente para a extração de RNA de ambos os tecidos de plântulas de milho, originando 2351,35 ?g por 100 mg de tecido para mesocótilo e 893,75 ?g por 100 mg de tecido para raiz, considerando tanto a quantidade como a qualidade das amostras, podendo ser submetidas às etapas posteriores de tratamento com DNAse e construção de cDNA para estudos de expressão gênica. Pôde-se observar que pequenas modificações nos protocolos, como, por exemplo, mudança no tempo e na posição dos tubos durante a incubação e o incremento de duas lavagens com clorofórmio, podem melhorar muito tanto a qualidade quanto a quantidade do RNA extraído.