DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Martins, Joana Cláudia Lourenço
Data de Publicação: 2021
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10316/99001
Resumo: Dissertação de Mestrado em Segurança Alimentar apresentada à Faculdade de Farmácia
id RCAP_54cf5f86b326fe7b52ed6136b22525c4
oai_identifier_str oai:estudogeral.uc.pt:10316/99001
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIRDETECTION AND MOLECULAR CHARACTERISATION OF ANTIBIOTIC-RESISTANT ENTEROBACTERICEAE ISOLATES IN READY-TO-EAT FRESH PRODUCTSprodutos frescos prontos a consumirresistência antimicrobianaEnterobactériasready-to-eat fresh produceantimicrobial resistanceEnterobacteriaceae bacteriaDissertação de Mestrado em Segurança Alimentar apresentada à Faculdade de FarmáciaA resistência antimicrobiana é atualmente uma das maiores ameaças à saúde pública, particularmente as Enterobactérias multirresistentes aos antibióticos. Os genes de resistência aos antibióticos (GRA) podem passar através da cadeia alimentar para a microbiota humana ou para bactérias potencialmente patogénicas. Os produtos frescos prontos a consumir representam um risco acrescido na disseminação de GRAs, uma vez que estes alimentos são consumidos sem nenhum processamento adicional. O objetivo deste estudo visa compreender se os produtos frescos prontos a consumir, representam um importante veículo de transmissão de bactérias Gram-negativo resistentes aos antibióticos para os seres humanos. Quarenta e duas amostras de diversos alimentos prontos a consumir, como saladas preparadas de frutas e vegetais, foram adquiridas em supermercados portugueses e processadas com e sem enriquecimento. As bactérias foram isoladas em gelose MacConkey com cefotaxima (CTX; 1 µg/mL) e colistina (COL; 2 µg/mL). O perfil de suscetibilidade antimicrobiana para seis antibióticos beta-lactâmicos foi determinado pelo método de difusão em disco e para COL pelo método de microdiluição em caldo. Das bactérias isoladas, foram selecionadas as que apresentaram uma ou mais resistência aos antibióticos, e /ou exposição aumentada a algum destes, para posteriormente se realizar a amplificação parcial do 16S rARN por reação em cadeia da polimerase. Dessas, 25 foram selecionadas para identificação molecular por sequenciação pelo método de Sanger; as sequências foram analisadas no Sequencher 5.0 (Gene Codes) e identificadas através do BLAST e GenBank. Através da seleção com CTX, foram identificadas maioritariamente espécies de Enterobactérias ambientais, como Rahnella spp., com reduzida suscetibilidade a CTX, Citrobacter portucalensis, resistente à cefoxitina e amoxicilina/ácido clavulânico (FOX, AMC), e Klebsiella oxytoca, com resistência a AMC, CTX, FOX e aztreonam (AZT). Pela seleção com COL, identificou-se um isolado de Yersinia enterocolitica, suscetível a todos os antibióticos em estudo. As espécies de Rahnella spp. e Serratia spp., também foram identificadas através desta seleção, apresentando resistência à COL. Neste estudo, não se verificou a presença das Enterobactérias Escherichia coli e Klebsiella pneumoniae nas amostras. Porém foi identificada uma bactéria patogénica oportunista, Klebsiella oxytoca, e ainda um isolado de Yersinia enterocolitica responsável por gastroenterites graves no ser humano, embora não se tenha verificado se correspondia ao serótipo patogénico. Os resultados obtidos demonstram a importância da avaliação microbiológica dos produtos frescos prontos a consumir, assim como necessidade da realização de mais estudos para estes alimentos, de modo a colmatar dúvidas e lacunas existentes sobre tema, tais como, a minimização de contaminação cruzada ao longo da cadeia alimentar, e perceber se existem outros parâmetros de avaliação microbiológica que devem ser reavaliados ou inseridos na legislação.Antimicrobial resistance is one of the current public health threats, particularly multidrug resistant Enterobacteriaceae. Antibiotic resistance genes (ARGs) may pass through the food chain to the human microbiome or to human pathogens. Ready to eat (RTE) vegetables represent an increased risk in the dissemination of ARGs, as the food is consumed without further manipulation. The aim of this study was to understand if RTE foods represent an important vehicle for the transmission of antibiotic-resistant bacteria to humans. Forty-two RTE fresh products samples were acquired from Portuguese supermarkets and processed with and without enrichment. The bacteria were isolated in MacConkey agar with cefotaxime (CTX; 1 µg/mL) or colistin (COL; 2 µg/mL). The antimicrobial susceptibility profile for six β-lactam antibiotics was determined by disk diffusion and for COL by broth microdilution. Selected isolates, with one or more antibiotic resistance and/or increased exposure, were identified by 16S rARN amplification by polymerase chain reaction and Sanger sequencing; sequences were analysed in Sequencher 5.0 (Gene Codes) and identified with BLAST and GenBank. The results under CTX selection showed the prevalence of environmental Enterobacteriaceae, such as Rahnella spp. that showed reduced susceptibility to CTX, Citrobacter portucalensis resistant to cefoxitin (FOX) and amoxicillin/clavulanic acid (AMC), and Klebsiella oxytoca, which was resistant to AMC, CTX, FOX and aztreonam (AZT). Under COL selection we identified one Yersinia enterocolitica, susceptible to all antibiotics in this study. Rahnella and Serratia species were also identified, and showed resistance to COL. In this study, the presence of Enterobacteriaceae, Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae was not found in the samples. However, an opportunistic pathogenic bacterium, Klebsiella oxytoca, was identified, as well as an isolate of Yersinia enterocolitica, responsible for severe gastroenteritis in humans, though it was not verified if it corresponded to the pathogenic serotype. The results obtained demonstrate the importance of the microbiological assessment of ready-to-eat fresh produce, as well as the need for further studies to be carried out on these foods, to resolve doubts and gaps that exist on this subject, such as minimising crosscontamination along the food chain, and to understand whether there are other microbiological assessment parameters that should be reassessed or included in the legislation.2021-10-15info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://hdl.handle.net/10316/99001http://hdl.handle.net/10316/99001TID:202955206porMartins, Joana Cláudia Lourençoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2022-03-05T22:11:11Zoai:estudogeral.uc.pt:10316/99001Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:16:43.129982Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
DETECTION AND MOLECULAR CHARACTERISATION OF ANTIBIOTIC-RESISTANT ENTEROBACTERICEAE ISOLATES IN READY-TO-EAT FRESH PRODUCTS
title DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
spellingShingle DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
Martins, Joana Cláudia Lourenço
produtos frescos prontos a consumir
resistência antimicrobiana
Enterobactérias
ready-to-eat fresh produce
antimicrobial resistance
Enterobacteriaceae bacteria
title_short DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
title_full DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
title_fullStr DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
title_full_unstemmed DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
title_sort DETEÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE ISOLADOS DE ENTEROBACTÉRIAS RESISTENTES A ANTIBIÓTICOS EM PRODUTOS FRESCOS PRONTOS A CONSUMIR
author Martins, Joana Cláudia Lourenço
author_facet Martins, Joana Cláudia Lourenço
author_role author
dc.contributor.author.fl_str_mv Martins, Joana Cláudia Lourenço
dc.subject.por.fl_str_mv produtos frescos prontos a consumir
resistência antimicrobiana
Enterobactérias
ready-to-eat fresh produce
antimicrobial resistance
Enterobacteriaceae bacteria
topic produtos frescos prontos a consumir
resistência antimicrobiana
Enterobactérias
ready-to-eat fresh produce
antimicrobial resistance
Enterobacteriaceae bacteria
description Dissertação de Mestrado em Segurança Alimentar apresentada à Faculdade de Farmácia
publishDate 2021
dc.date.none.fl_str_mv 2021-10-15
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10316/99001
http://hdl.handle.net/10316/99001
TID:202955206
url http://hdl.handle.net/10316/99001
identifier_str_mv TID:202955206
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799134062883897344

Registros relacionados