Studies on the genetics of artemisinin resisteance in malaria

• Autor(a) principal: RODRIGUES, Ana Júlia Pinto Fonseca Sieuve Afonso
• Data de Publicação: 2007
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/59129
• topic: Parasitologia médica; Plasmodium falciparum; Malária; Sulfadoxina-pirimetamina; Cloroquina; Resistência; Artemisinina; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A existência de estirpes do parasita, Plasmodium falciparum resistentes a multiplos fármacos tais como; cloroquina (CQ) e sulfadoxina-pirimetamina (SP) é um dos problemas mais graves no controlo da malária. Novos fármacos, como a artemisinina (ART) e seus derivados, particularmente em combinação com outros fármacos, são cada vez mais utilizados no tratamento da malaria. Embora até ao momento a fármaco-resistência estável à ART quer in vitro quer in vivo não tenha sido registada, o seu surgimento seria desastroso devido á falta de alternativas. O trabalho apresentado nesta tese descreve a selecção de resistência estável a ART e ao artesunato (ATN). Este trabalho foi realizado usando o modelo roedor de malária Plasmodium chabaudi chabaudi (Plasmodium chabaudi). Duas linhas parasitáricas diferentes, AS-15CQ e AS-30CQ, foram feitas crescer na presença de concentrações crescentes de ATN e ART, e que no final apresentavam uma resistência de 6 e 15 vezes superior ao ATN e à ART, respectivamente (estas novas linhas obtidas foram nomeadas AS-ATN e AS-ART). A resistência é estável mesmo após clonagem, congelamento/descongelamento, passagem sanguínea na ausência de pressão de fármaco e transmissão através do mosquito vector. A sequência nucleotídica e o número de cópias dos genes descritos como moduladores putativos de resistência à ART: mdr1, cg10, tctp e atp6; foi comparada entre parasitas resistentes e sensíveis. Não tendo sido encontradas alterações na sequência ou no número de cópias destes genes. Numa tentativa de identificar os genes encolvidos na resistância à ART e ao ATN a técnica de Linkage Group Selection (LGS) foi utilizada e dois cruzamentos genéticos entre os clones fármaco-resistentes; AS-ART e AS-ATN e o clone geneticamente distinto dos anteriores e sensível aos fármacos em estudos; AJ; foram realizados. Foram encontrados sobre selecção em ambos os cruzamentos genéticos quatro loci; cromossomas de P. chabaudi 1, 2, 6 e 8. Atendendo a que, a selecção no cromossoma 2 era mais forte, este locus foi submetido a análises genéticas subsequentes. Tendo sido encontradas duas mutações diferentes (V739F e V770F) num gene que codifica para um enzima de desubiquitinação (ubp-1).As implicações destes resultados serão discutidas.