Contribuição do efluxo para a resistência a compostos antimicrobianos em Staphylococcus epidermidis

• Autor(a) principal: ROSA, Mafalda Sofia Reisinho de Oliveira
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/20443
• topic: Ciências biomédicas; Biologia molecular; Staphylococcus epidermidis; Antibióticos; Resistência; Efluxo; Genes qac; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A bactéria Staphylococcus epidermidis faz parte da flora comensal de humanos e animais, sendo considerada um agente patogénico oportunista. Os compostos antimicrobianos, como antibióticos ou biocidas, são amplamente utilizados no tratamento e prevenção de infecções causadas por esta e outras bactérias na prática clínica, humana ou veterinária. No entanto, o aumento constante da resistência a estes compostos é actualmente um grave problema de saúde pública. Um dos mecanismos de resistência a compostos antimicrobianos é a sua extrusão por bombas de efluxo, algumas das quais codificadas em plasmídeos, como é o caso dos sistemas QacA/B e Smr. Porém, pouco se sabe acerca da sua prevalência e contribuição para a resistência aos antimicrobianos em S. epidermidis. Neste trabalho, pretendeu-se avaliar a frequência dos determinantes qacA/B e smr em S. epidermidis isolados de animais ou humanos em contacto próximo com estes, correlacionando a presença de QacA/B e Smr com a capacidade de efluxo e o perfil de susceptibilidade a antibióticos. Para tal, foram estudadas duas colecções de S. epidermidis, correspondendo a 17 isolados provenientes de locais de infecção em animais de companhia (cães e gatos) e 112 isolados de colonização nasal em profissionais e estudantes de Medicina Veterinária. A identificação dos isolados foi confirmada através de ITS-PCR e o seu perfil de susceptibilidade a antibióticos determinado através do método de difusão em disco e pesquisa por PCR do gene mecA. Os determinantes plasmídicos qacA/B e smr foram também pesquisados por PCR. A actividade de efluxo foi detectada pela determinação da concentração mínima inibitória (CMI) de brometo de etídeo (EtBr) e pelo método de “Cartwheel” e caracterizada por fluorometria em tempo-real para um conjunto de isolados representativos dos genótipos encontrados. Os isolados de ambas as colecções apresentaram uma elevada frequência de resistência a diversas classes de antibióticos, nomeadamente, β-lactâmicos, macrólidos, ácido fusídico e fluoroquinolonas, assim como tetraciclinas para os isolados de infecção em animais, e aminoglicosídeos nos isolados de colonização em humanos. A abordagem metodológica aplicada permitiu detectar uma alta frequência de isolados com actividade de efluxo aumentada, correlacionável com a presença dos determinantes plasmídicos qacA, qacB e smr, sendo o primeiro o mais frequente. Os isolados com qacA apresentaram valores de CMI para o EtBr superiores aos dos isolados com smr, bem como maior actividade de efluxo. Entre os 129 isolados de S. epidermidis estudados, 62 são multirresistentes aos antibióticos. Embora os antibióticos não sejam substratos dos sistemas de efluxo estudados, a elevada frequência de isolados com qacA/B ou smr nestes isolados indica uma contribuição dos sistemas QacA/B e Smr para este fenótipo, que se sugere ocorra por co-selecção de outros determinantes de resistência plasmídicos ou pela vantagem selectiva que estes sistemas conferem na resposta a agentes antimicrobianos. As frequências de resistência aos antibióticos e dos sistemas de efluxo plasmídicos QacA/B ou Smr observadas nas duas colecções de S. epidermidis estudadas realçam a relevância da componente veterinária no desenvolvimento e disseminação da resistência aos antimicrobianos e a necessidade de realizar mais estudos que incluam esta vertente, para uma melhor compreensão deste problema e desenho de estratégias eficazes de resposta à sua emergência.