Relevância da validação de um ensaio Sorológico usado para diagnóstico diferencial de Zika vírus

• Autor(a) principal: Licínio, Christiane Oliveira Lima
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEG
• Texto Completo: http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/1095
• topic: Zika vírus; Síndrome de Guillain-Barrè; Sensibilidade analítica; Especificidade analítica; Guillain-Barrè syndrome; In vitro Diagnosis; Analytical specificity; Analytical sensitivity; Guillain-Barrè syndrome; Zika virus; OUTROS

O surto de Zika Vírus (ZIKV) já não é mais um emergência em saúde pública no Brasil, porém as sequelas do primeiro evento ainda ressoarão por um longo período. Os principais sintomas clínicos são: erupção macular ou maculopapular com presença de prurido, dor de cabeça, artralgia, mialgia, prostração, conjuntivite não-purulenta, e pode, ou não, estar associada a febre baixa. Há vários impactos sociais e econômicos em decorrência do surto de ZIKV de 2015 no Brasil, como a microcefalia e a Sìndrome de Guillain-Barrè. A SGB é uma complicação neurológica inflamatória, que pode acontecer pós-infecção por ZIKV, geralmente diagnosticada pelos sintomas apresentados pelo paciente como fraqueza nos músculos, perda de sensibilidade nas extremidades e diminuição dos reflexos. DENV e ZIKV são RNA vírus homólogos. Chegam a compartilhar, ao menos, 41% de semelhança na sequência de aminoácidos da proteína E, primeira a ser reconhecida pelo organismo durante a infecção. A principal reação cruzada que pode ocorrer em infecções por DENV e ZIKV é a Antibody-Dependent Enhancement (ADE). Esse fenômeno pode causar um asseveramento na infecção, trazendo consequências até letais, como no caso da Febre da Dengue Hemorrágica, na infecção pelo DENV. A diferenciação entre ZIKV e DENV, feita somente por diagnóstico clínico não é confiável. O diagnóstico laboratorial é essencial para essa diferenciação, principalmente nos casos de estágio de convalescência da doença. As reações cruzadas com os demais Flavivirus são comuns, devido à semelhança genética entre os vírus. O PCR em tempo real é realizado durante a fase aguda da doença, restrita a um período de 3 a 5 dias. Os testes sorológicos são realizados tanto na fase aguda (anticorpos do tipo IgM) quanto na fase de convalescência (anticorpo do tipo IgG). O desenvolvimento de um kit de ELISA é feita em três estágios: Desenvolvimento, Otimização e Validação. A fase de validação verifica o desempenho do kit quanto à sensibilidade, especificidade e precisão. Este estudo tem como objetivo estabelecer a diferenciação do diagnóstico de Zika vírus, por meio da estruturação de um ensaio imunoenzimático, metodologia ELISA, para detecção de anticorpos da classe IgG. Em sua maioria, os testes de ELISA são importados de outros países, já que o Brasil não os produz internamente ou possuem qualidade inferior aos produtos importados. Isso significa menor custo para os laboratórios e maior qualidade nos produtos nacionais. A Linearidade e a Exatidão do kit foi comprovada. A Sensibilidade Analítica do kit foi de 97,8% ajustado. A Especificidade Analítica foi de 100%. Não houve reação cruzada com os anticorpos anti-DENV em nenhuma das amostras analisadas.