Avaliação de diferentes soluções de criopreservação na conservação do pavilhão auricular apical de Dasyprocta leporina (LINNAEUS, 1758)
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| Data de Publicação: | 2020 |
| Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
| Idioma: | por |
| Título da fonte: | Repositório Digital da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (RDU) |
| Texto Completo: | https://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/5673 |
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Avaliação de diferentes soluções de criopreservação na conservação do pavilhão auricular apical de Dasyprocta leporina (LINNAEUS, 1758)Roedores silvestresCutiaBiobancosVitrificação tecidualTecidos somáticosCIENCIAS BIOLOGICAS::BIOTECNOLOGIAMonografiaA Dasyprocta leporina é roedor de grande importância para a manutenção da flora, atuando como dispersor de sementes, além de servir como um modelo experimental. Nesse cenário, o desenvolvimento adequado de bancos de tecidos somáticos nesta espécie representa uma ferramenta interessante para a conservação da biodiversidade. Portanto, o objetivo foi avaliar diferentes soluções crioprotetoras na conservação do pavilhão auricular apical de D. leporina. Para tanto, foram utilizadas seis fêmeas pertencentes ao Centro de Multiplicação de Animais Silvestres (CEMAS/UFERSA). No laboratório, os fragmentos teciduais foram tricotomizados, fragmentados em 9,0 mm³ e divididos em não vitrificado (grupo controle) e grupos vitrificados pelo método em superfície sólida com a solução base sendo meio essencial mínimo modificado por Dulbecco e 10% de soro fetal bovino com as combinações: etilenoglicol (grupo EG), EG + sacarose (grupo EG-SAC), dimetilsulfóxido (grupo DMSO), DMSO + SAC (grupo DMSO-SAC), EG + DMSO (grupo EG-DMSO) e EG + DMSO + SAC (grupo EG-DMSO-SAC). Todos os grupos foram fixados e processados para análise qualitativa ultraestrutural por microscopia eletrônica de varredura (MEV), análise histomorfométrica (mensuração das camadas da pele, matriz extracelular, quantificação de halos perinucleares, células e lacunas) pela histologia clássica e avaliação do potencial proliferativo pela marcação das regiões organizadoras nucleolares argirofílicas (AgNOR). Todos os dados foram expressos como média ± erro padrão (um animal/uma repetição) e analisados por ANOVA seguido de teste de Tukey. A análise ultraestrutura por microscopia eletrônica de varredura permitiu a visualização das camadas da pele, além da identificação do pericôndrio, da cartilagem e suas lacunas. Além disso, uma visualização geral da espessura desses componentes teciduais foi observada. Quanto à análise da espessura da pele, a epiderme foi reduzida em todos os grupos vitrificados quando comparada aos fragmentos do grupo controle (P < 0,05). Contudo, a espessura dos fragmentos do grupo EG não foi alterada pela criopreservação. Além disso, a derme foi apenas reduzida nos grupos EG e DMSO-SAC quando comparados ao controle (P < 0,05). Quanto à espessura de pele total, observou-se que EG (110,8 μm ± 13,6), DMSO (143,7 μm ± 18,7) e EG-DMSO-SAC (125,1 μm ± 17,9) não foram afetados pela criopreservação, sendo similar ao controle (122,2 μm ± 46,9). Por outro lado, independente da solução crioproterora, a espessura do pericôndrio e o número de fibroblastos foram alterados pela criopreservação. Além disso, nenhuma diferença foi observada entre os fragmentos do grupo controle (5,0 ± 2,0) e vitrificados com EG-SAC (5,0 ± 4,6), DMSO-SAC (8,0 ± 4,8), EG-DMSO (5,0 ± 2,0) e EG-DMSO-SAC (4,0 ± 1,8). Quanto aos halos, o grupo controle apresentou 5,0 ± 2,0 e dentre os tratamentos, assemelharam-se ao controle os grupos EG-SAC (5,0 ± 4,6), DMSO-SAC (8,0 ± 4,8), EG-DMSO (5,0 ± 2,0) e EG-DMSO-SAC (4,0 ± 1,8). Quanto à avaliação da cartilagem, independente da solução crioprotetora, a criopreservação alterou o número de lacunas totais e condrócitos normais (P < 0,05). Contudo, apenas o grupo EG-DMSO-SAC manteve o número de lacunas vazias (13,0 ± 3,8) similares ao controle (11,9 ± 2,6). Ainda, fragmentos dos grupos EG (9,0 ± 1,9), DMSO-SAC (9,0 ± 2,0) e EG-DMSO-SAC (8,0 ± 2,4) mantiveram a quantidade de condrócitos degenerados similar ao controle (9,0 ± 2,0). Quanto à avaliação da matriz proteica, todas soluções de criopreservação resultaram em alteração no percentual de fibras colágenas. Para a análise do potencial proliferativo, exceto o grupo EG, os demais grupos vitrificados foram similares ao controle o número de AgNOR/célula. Já para a área de AgNOR/célula, somente o grupo EG-SAC não reduziu a área por célula. Em síntese, a combinação EG-DMSO-SAC resultou na melhor composição de crioprotetores para a conservação do pavilhão auricular apical de D. leporina, evidenciando a possibilidade de usar essa amostra como fonte de células para biotecnologias subsequentes, como a transferência nuclear de células somáticas.Trabalho não financiado por agência de fomento, ou autofinanciadoUniversidade Federal Rural do Semi-ÁridoBrasilCentro de Ciências Biológicas e da Saúde - CCBSUFERSAPereira, Alexsandra FernandesBorges, Alana AzevedoPraxedes, Érica Camila GurgelRodrigues, Luanna Lorenna Vieira2020-12-07T18:06:21Z2020-12-072020-12-07T18:06:21Z2020-02-03info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisapplication/pdfCitação com autor incluído no texto: Rodrigues (2020) Citação com autor não incluído no texto: (RODRIGUES, 2020)https://repositorio.ufersa.edu.br/handle/prefix/5673porRODRIGUES, Luanna Lorenna Vieira. Avaliação de diferentes soluções de criopreservação na conservação do pavilhão auricular apical de Dasyprocta leporina (LINNAEUS, 1758). 2020. 67 f. Monografia (Graduação em Biotecnologia). Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, Universidade Federal Rural do Semi-Àrido, Mossoró, 2020.CC-BY-SAinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Digital da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (RDU)instname:Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA)instacron:UFERSA2023-12-07T21:29:33Zoai:repositorio.ufersa.edu.br:prefix/5673Repositório Institucionalhttps://repositorio.ufersa.edu.br/PUBhttps://repositorio.ufersa.edu.br/server/oai/requestrepositorio@ufersa.edu.br || admrepositorio@ufersa.edu.bropendoar:2023-12-07T21:29:33Repositório Digital da Universidade Federal Rural do Semi-Árido (RDU) - Universidade Federal Rural do Semi-Árido (UFERSA)false |
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