As trans-sialidases de Trypanosoma cruzi como fatores de virulência e alvos para o desenvolvimento de vacinas para doença de Chagas.

• Autor(a) principal: Carlos Roberto de Almeida Júnior
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/55874
• topic: Trans-sialidase; Repetições SAPA; T. cruzi; Bioquímica e Imunologia; Doença de Chagas; Trypanosoma cruzi; Neuraminidase; Vacinas

As trans-sialidases (TS) são proteínas presentes na superfície do Trypanosoma cruzi, codificadas por uma família multigênica e altamente variável. Somente um sub-grupo das TS possui atividade catalítica, responsável por transferir resíduos de ácido siálico de glicoconjugados do hospedeiro para mucinas na superfície do parasito, um mecanismo relacionado à capacidade de evasão do parasito ao sistema imune do hospedeiro. Algumas TS possuem um domínio na porção C-terminal da proteína contendo repetições de 12 aminoácidos denominadas SAPA (shed acute parasite antigen). Além de ser altamente imunogênico, o domínio SAPA aumenta a estabilidade da enzima na corrente sanguínea, sendo considerado um fator de virulência do parasito. No presente trabalho, a sequência de uma TS ativa contendo ou não repetições SAPA foi avaliada como candidata vacinal para duas estratégias de vacinas: com proteína recombinante e vacina de RNA. Três versões da proteína recombinante foram produzidas em E. coli: a proteína completa (TS completa), a proteína sem as repetições (TS sem SAPA) e a proteína contendo somente as repetições SAPA (TS-SAPA). Camundongos BALB/c foram imunizados com as proteínas e desafiados com uma cepa virulenta de T. cruzi. Análises da resposta imune celular mostraram que a imunização com a TS sem SAPA resultou em maiores níveis de IFN-γ e menores níveis de IL-10 produzidos pelos esplenócitos dos animais em comparação com esplenócitos dos animais imunizados com a TS completa, ou com a proteína contendo somente as repetições SAPA. Além disso, após o desafio, a imunização dos animais com a proteína contendo somente as repetições SAPA resultou em maior parasitemia e mortalidade, comparada à imunização com a TS sem SAPA. Importante ressaltar que os tecidos dos animais imunizados com a TS sem SAPA não exibiram infiltrado inflamatório nem níveis detectáveis de DNA do parasito no coração. Portanto, esses resultados indicam que a imunização com a TS sem repetições SAPA é a melhor opção para induzir o desenvolvimento de uma resposta Th1 protetora, essencial para o controle da infecção por patógenos intracelulares, e que a presença de repetições SAPA resulta em uma modulação negativa dessa resposta protetora. Visto que as vacinas de RNA apresentam diversas vantagens na imunização e a TS sem SAPA se apresentou como antígeno promissor para um modelo vacinal contra a doença de Chagas, o mRNA dessa proteína foi produzido e testado em uma formulação lipídica para imunizar animais em experimentos futuros.