Avaliação do tratamento com VU0409551 em astrócitos derivados de hiPSCs estimulados com citocinas pró-inflamatórias associadas à Esclerose Múltipla

• Autor(a) principal: Nathália Costa Silva
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/53371
• topic: Esclerose Múltipla; reatividade astrocitária; mGluR5; PAM; VU0409551; Bioquímica e imunologia; Esclerose Múltipla; Astrócitos; Receptor de Glutamato Metabotrópico

A esclerose múltipla (EM) é uma doença neuroinflamatória, autoimune, crônica e incapacitante, em que se desenvolve uma resposta imune auto-reativa voltada para proteínas da bainha de mielina, bem como infiltrado inflamatório no SNC, excitotoxicidade, astrogliose e neurodegeneração. Os astrócitos, que constituem o tipo celular mais abundante no SNC de mamíferos, se tornam reativos mediante injúria. Já foi demonstrado que a ativação do receptor metabotrópico de glutamato 5 (mGluR5) é neuroprotetora mediante insulto de glutamato e pode inibir a sinalização microglial pró-inflamatória in vitro, bem como induzir a expressão microglial do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF) em modelo murino da EM. Atualmente, não existem abordagens terapêuticas capazes de tratar de modo simultâneo a neuroinflamação e a neurodegeneração que ocorrem durante a EM. No presente trabalho, buscou-se estabelecer estímulo pró-inflamatório com as citocinas associadas à patologia da EM e à reatividade astrocitária, fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), interleucina 1 beta (IL-1β) e fator estimulador de colônias de granulócitos e macrófagos (GM-CSF), e avaliar possível efeito protetor do modulador alostérico positivo (MAP) do mGluR5, o VU0409551, em culturas de astrócitos derivadas de células tronco humanas de pluripotência induzida (hiPSCs) submetidas ao insulto pró-inflamatório. Observamos aumento da expressão de TNF-α e IL-1β a partir do estímulo com TNF-α e IL-1β por 24h. Além disso, o VU0409551 induziu aumento da expressão de IL-6, de modo independente do estímulo com TNF-α e IL- 1β. Observou-se também efeito marginal do tratamento com 1μM de VU0409551 na prevenção do aumento da expresão de IL-1β induzida pelo estímulo pró-inflamatório com TNF-α e IL-1β ao longo de 24h. Os resultados não sugerem alterações na expressão dos demais alvos avaliados, IL-10, GNR, BDNF e EAAT1, e nas concentrações de glutamato dos meios condicionados de astrócitos estimulados com TNF-α, IL-1β e tratados com VU0409551. Desse modo, o possível potencial anti- infamatório de VU0409551 não foi confirmado pelos resultados no presente trabalho.