Avaliação das vacinas de DNA contendo os genes Sm29 e TSP-2 e a utilização dos nanobastões de ouro como uma nova formulação vacinal contra a esquistossomose mansônica

• Autor(a) principal: Natan Raimundo Gonçalves de Assis
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/35477
• topic: Bioquímica; Imunologia; Bioquímica e imunologia; Esquistossomose; Vacinas; Nanotecnologia

Esquistossomose é uma importante parasitose mundial, afetando mais de 207 milhões de pessoas em 76 países ao redor do mundo e causando aproximadamente 250.000 mortes por ano. Atualmente, a estratégia adotada para o controle da esquistossomose é a utilização de quimioterápicos, como por exemplo, Praziquantel. Porém, altas taxas de reinfecção após o tratamento limitam tal estratégia e pressupõe a necessidade de outras formas de controle como avacinação. Sm29 e tetraspanina-2 são duas proteínas encontradas no tegumento de vermes adultos e esquistossômulos de S. mansoni, e são consideradas como potenciais candidatos vacinais. Neste trabalho objetivamos avaliar em modelo murino vacinas de DNA contendo tais genes, sozinhas ou conjuntamente. Através de avaliações por RTPCR e western blot, confirmamos que nossas vacinas de DNA apresentavam a capacidade de serem transcritas e traduzidas em células BHK-21. Quando avaliado o perfil da resposta imunológica, observamos um perfil Th1 com a produção das citocinas TNF-α e IFN-γ. Quando avaliada a redução de vermes e redução na área dos granulomas hepáticos, o plasmídeo pUMVC3/Chimera foi o mais promissor (31% e 37%, respectivamente). Devido as características químicas, físicas e imunológicas das nanopartículas, nanocarreadores vem atraindo a atenção de diversos pesquisadores. No campo da nanotecnologia, os nanobastões de ouro aparecem como candidatos promissores como carreadores vacinais. Neste trabalho, ligamos a proteína rSm29 de S. mansoni em nanobastões de ouro, diretamente ou através da funcionalização com a cisteamina. Quando avaliado o potencial protetor de nossos candidatos, os animais do grupo AuNRs-NH2-rSm29 apresentaram os maiores níveis de proteção (29%), sendo que, tais níveis de proteção foram principalmente relacionados a redução no número de vermes fêmeas. Os resultados indicam que a resposta imune protetora obtida foi mediada principalmente por uma resposta de perfil Th1, com produção de IFN-γ e TNF-α. Ademais, o grupo imunizado com AuNRs-NH2-rSm29 foram capazes de induzir a ativação de células dendríticas in vitro, aumentando a expressão de MHCII e MHCI e a produção de IL-1β. Em resumo, a estratégia de vacinação utilizando nanopartículas como avaliado nesse estudo, demonstrou ser promissora para a obtenção de novas formulações vacinais para o controle de doenças infecciosas.