Desenvolvimento e aplicação de uma metodologia para varredura de polimorfismo relacionado à resistência aos Benzimidazóis em Ancylostoma caninum

• Autor(a) principal: Luis Fernando Viana Furtado
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/BUBD-9HEGX6
• topic: Ancylostoma caninum; -tubulina; Resistência à droga; Benzimidazóis; Parasitologia

Ancylostoma caninum é considerado um importante parasito de canídeos, além de manifestar grande relevância zoonótica como agente de enterite eosinofílica e infecções cutâneas em humanos. A administração da droga em massa, sobretudo com benzimidazóis, corresponde ao principal método de controle dessa parasitose. Todavia, essa estratégia é considerada vulnerável por selecionar cepas de parasitos resistentes à droga. Mutações nos códons 167, 198 e 200 do gene da -tubulina isotipo 1 já foram associadas com resistência aos benzimidazóis em alguns nematódeos, de modo que a mutação no códon 200 foi detectada inclusive em ancilostomídeos de humanos, mas não relatada ainda em A. caninum. O objetivo desse trabalho foi realizar uma varredura de polimorfismos nos códons 198 e 200 do gene da -tubulina isotipo 1 de A. caninum coletados em duas diferentes regiões do Brasil. Foram coletados 162 vermes de cães provenientes de Centros de Controle de Zoonoses da cidade de Belo Horizonte, Minas Gerais, e 149 de Teresina, Piauí. Para análise do códon 200, foi desenvolvida uma ferramenta molecular baseada em ARMS-PCR, e para tanto, controles foram construídos tanto para ausência da mutação, por meio de PCR convencional, como para a presença da mutação, pela técnica de Megaprimer-PCR. Embora em baixa frequência (0,8%), a mutação no códon 200 foi observada apenas em vermes coletados em Minas Gerais, enquanto que as amostras provenientes do Piauí não apresentaram mutação para nenhum dos dois códons analisados. Um total de 75 amostras foram submetidas a sequenciamento, para validação da técnica padronizada e para varredura do códon 198. O sequenciamento validou a técnica desenvolvida e não mostrou correlação entre as mutações. Conclui-se que existe baixa frequência da mutação no códon 200 na população de A. caninum analisada. Esse é o primeiro relato que determina a presença dessa mutação em populações da espécie em questão, reforçando a necessidade de monitoramento de cepas de ancilostomídeos resistentes aos benzimidazóis, haja vista a emergência do problema em outras espécies.