Avaliação da atividade osteogênica da doxiciclina em uma matriz de compósito biodegradável de poli (-caprolactona), poli (ácido lático-co-glicólico) e biocerâmica in vitro

• Autor(a) principal: Vivianne Carvalho da Cunha
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/ZMRO-8XKJ2X
• topic: Doxiciclina uso terapêutico; Compômeros uso terapêutico; Osteoblastos; Cerâmica odontológica; Biocompatibilidade; Compômeros; Doxiciclina/uso terapêutico; Compósitos poliméricos; Ossos Regeneração; Biomateriais; Polímeros

Compósitos de polímeros biodegradáveis e biocerâmicas são uma alternativa na área de engenharia de tecidos para regeneração óssea, já que combinam a bioatividade das biocerâmicas com a flexibilidade dos polímeros. A doxiciclina (DOX) é um antibiótico de largo espectro, tem amplo uso como um auxiliar na terapia periodontal. DOX pode sofrer degradação sob oscilação do pH, calor e umidade, e efeitos tóxicos. Para superar estes, sistemas de encapsulamento com ciclodextrinas (CDs) permitem a sua liberação controlada, que reduzem a frequência de administração, concentração terapêutica eficaz e prolonga o seu efeito terapêutico para permitir a regeneração dos tecidos periodontais. No entanto, pouco se sabe sobre o mecanismo de ação do composto de inclusão. Neste trabalho, o objetivo foi avaliar compósitos de policaprolactona (PCL), poli (ácido lático-co-glicólico) (PLGA) e biocerâmica de fosfato de cálcio bifásico (BCP) carregados com DOX encapsulada em âcd para avaliar a sua biocompatibilidade e atividade sobre células osteoblastos. O compósito BCP/PCL/PLGA/DOX/âcd foi preparado com método de dupla de mistura. O PCL e o PLGA (50:50) foram dissolvidos em diclorometano (DMC) e adicionado BCP na razão 1:4 (PCL+PLGA/BCP) com adição de DOX ou DOX/âcd em concentrações decrescentes entre 25µl/ml e 1µl/ml. A viabilidade celular/proliferação de osteoblastos foi avaliada utilizando o MTT (24h, 7 e 14 dias) e a atividade de fosfatase alcalina (FA) e colágeno foram avaliados com 7 e 14 dias e Von Kossa com 14 dias. A estrutura dos compósitos foi avaliada por meio da Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). Os resultados obtidos após testes de MTT mostraram maior proliferação celular, na presença do compósito BCP/PCL/PLGA/DOX/âcd, concentração 25µl/ml, com diferença estatística significativa (p<0,05) em relação ao controle, em todos os tempos experimentais, sendo maior na segunda semana. Os resultados da FA mostraram que o compósito com DOX incluída apresentou diferença estatística significativa (p<0,05) em relação ao controle, em todos os tempos experimentais, sendo maior na segunda semana. Verificou-se um aumento da FA. Estes resultados sugerem atividade dos osteoblastos durante a osteogênese, estando relacionada à deposição de matriz óssea por estas células. Os resultados da produção de colágeno pelas células osteblásticas foi maior na presença do compósito e apresentou diferença estatística significativa (p<0,05) em relação ao controle, apenas na segunda semana. Estes resultados sugerem que o aumento de secreção de colágeno está relacionado à atividade osteogênica. As células produziram mais colágeno no decorrer dos períodos analisados indicando que estas células sofreram osteogênese até os 14 dias de cultivo, produzindo matriz extracelular na presença do compósito. Os resultados de marcação por Von Kossa das células submetidas à indução osteogênica na presença do compósito mostraram, visualmente, a atividade osteogênica das células, através da formação dos nódulos de mineralização no período de 14 dias. A avaliação da estrutura arquitetônica porosa do compósito pela MEV mostra que sua topografia superficial é apropriada para o cultivo dos osteoblastos. Estes resultados permitem concluir que o compósito permitiu a viabilidade celular, favoreceu maior proliferação das células e atividade osteogênica para sua aplicação na engenharia de tecidos ósseos.