Influência de antifúngicos ambientais sobre a tolerabilidade aos antifúngicos clínicos, morfo-fisiologia e virulência em Cryptococcus gattii e C. neoformans

• Autor(a) principal: Rafael Wesley Bastos
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/35494
• topic: Agroquímicos; Criptococose; Bombas de efluxo; Resistência cruzada; Pseudohifa; Microbiologia; Agroquímicos; Cryptococcus gattii; Criptococose; Cryptococcus neoformans

Cryptococcus gattii e C. neoformans são os principais agentes etiológicos da criptococose. Por esses patógenos serem encontrados associados a plantas e devido ao aumento da utilização de agroquímicos, nesse trabalho nós avaliamos a hipótese de que a exposição a antifúngicos ambientais poderia afetar a tolerância a antifúngicos clínicos e a virulência de Cryptococcus spp. A exposição aos agroquímicos tebuconazol (TBZ) e piraclostrobina (PCT) aumentou a tolerância ( resistência cruzada) de algumas linhagens de C. gattii e C. neoformans ao fluconazol (FCZ), itraconazol e ravuconazol, mas o mesmo efeito não foi observado quando metalaxil foi usado. Algumas linhagens continuaram apresentando resistência cruzada aos azólicos clínicos mesmo após o contato com os agroquímicos ter cessado. Além da alteração da tolerância antifúngica, TBZ e PCT causaram alterações morfológicas em Cryptococcus, sendo que algumas linhagens formaram pseudohifas em contato com os agroquímicos. Células de C. gattIi R265 e C. neoformans H99 expostas a TBZ foram menos virulentas em modelo murino do que células não expostas. Contudo, leveduras recuperadas de animais infectados com células previamente expostas a TBZ continuaram apresentando tolerância ao azólicos clínicos. Essa tolerância in vivo foi confirmada quando o tratamento com FCZ não foi capaz de diminuir a carga fúngica no pulmão dos animais infectados com células expostas a TBZ. O aumento da tolerância aos antifúngicos pode ser explicado pelo aumento da expressão de ERG11 e das bombas de efluxo, PDR11 (AFR1) e MDR1. Em relação a exposição à PCT, apesar das células de C. gattii R265 expostas a esse agroquímico e depois cultivadas em meio sem a droga por 10 passagens (células 10p) serem menos virulentas em modelo animal murino comparada às células não-expostas,.elas demonstraram ser mais tolerantes ao tratamento in vivo com FCZ. Essa tolerânica pode ser atribuída a maior expressão de bombas de efluxo e a diminuição da virulência poderia ser atribuída a menor expressão de genes relacionados com vias de aquisição de íons, como mostra a análise transcriptômica. Conclui-se, portanto, que a exposição aos agroquímicos TBZ e PCT aumenta a tolerância a azólicos clínicos, altera a morfologia e diminui a virulência de Cryptococcus gattii e C. neoformans.