Efeito de dois probióticos, Saccharomyces boulardii e Saccharomyces cerevisiae linhagem UFMG 905, na resposta inflamatória induzida por Salmonella enterica subsp. enterica sorovar. Typhimurium

• Autor(a) principal: Flaviano dos Santos Martins
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFMG
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/1843/51742
• topic: Probióticos; Bactérias; Saccharomyces cerevisiae; Probióticos/efeitos adversos; Saccharomyces boulardii; Saccharomyces cerevisiae; Salmonella enterica; Infecções por Salmonella/terapia; Dissertação Acadêmica

Probióticos são definidos como microrganismos viáveis que exibem um efeito benéfico na saúde do hospedeiro, quando ingeridos em quantidades suficientes. Muitas espécies de bactérias são usadas para esse fim e a única levedura utilizada como probióticos em seres humanos é Saccharomyces boulardii. Resultados anteriores obtidos em nosso laboratório mostraram que a levedura Saccharomyces cerevisiae linhagem UFMG 905, isolada da produção de cachaça, foi capaz de colonizar e sobreviver no trato gastrintestinal de camundongos, isentos de germes e convencionais, respectivamente, além de proteger esses animais contra um desafio oral com Salmonella enterica subsp. enterica sorovar Typhimurium e Clostridium difficile. Na primeira parte desse trabalho, os efeitos de S. cerevisiae UFMG 905 na translocação de Salm. Typhimurium para os linfonodos mesentéricos, placas de Peyer, baço e fígado, assim como o efeito no sistema imune, pela contagem de células de Küpffer, produção de imunoglobulinas e clareamento de Escherichia coli B41 da corrente sanguínea, foram avaliados em camundongos gnotobióticos e/ou convencionais. O tratamento com a levedura reduziu significantemente a translocação de Salm. Typhimurium para o fígado de animais gnotobióticos e, para todos os órgãos testados, em animais convencionais. O número de células de Küpffer (por 100 hepatócitos) foi significantemente maior (P < 0,05) em camundongos monoassociados com a levedura (52,9 ± 15,7) que em camundongos isentos de germes (38,1 ± 9,0). Provavelmente, como uma consequência do aumento do número de células de Küpffer, o clareamento de E. coli B41 da corrente sanguínea foi mais eficiente nos animais monoassociados com a levedura, quando comparado com os animais controle isentos de germes. Foram observados maiores níveis de sIgA no conteúdo intestinal e de IgA e IgM no soro (P < 0,05) nos camundongos monoassociados com a levedura que no grupo isento de germes. Concluindo, a proteção observada contra a bactéria enteropatogênica em nosso estudo anterior foi, provavelmente, devida à modulação local e sistêmica do sistema imune de camundongos tratados com S. cerevisiae UFMG 905. Na segunda parte desse trabalho, estudou-se os efeitos de S. boulardii e S. cerevisiae UFMG 905 na inflamação e na sinalização celular induzidos pela Salm. Typhimurium 14028, em células T84. Observou-se que os dois probióticos mantiveram a resistência elétrica transepitelial e diminuiram, significativamente, a secreção de IL-8 em células T84 infectadas por Salm. Typhimurium 14028 (P < 0,05). Saccharomyces cerevisiae UFMG 905 e S. boulardii diminuiram, significativamente, os níveis de invasão pela Salm. Typhimurium 14028 (P < 0,05), mas nenhum efeito das leveduras nocrescimento ou adesão bacteriana em células T84 foi observado. Diferentemente de S. boulardii, S. cerevisiae UFMG 905 não foi capaz de diminuir a ativação de Rac1 e Cdc42 em células infectadas por Salm. Typhimurium 14028. Essas duas proteínas são Rho-GTPases ativadas pela bactéria e estão envolvidas na internalização de bactérias invasivas. A ligação de Salm. Typhimurium 14028 à superfície de S. cerevisiae UFMG 905 e S. boulardii, e não às células epiteliais do intestino, pode ser responsável pela diminuição da invasão e ativação de MAPKs (mitogen-activated protein kinases) e, conseqüentemente, pela diminuição dos níveis de IL-8, uma vez que esse processo diminui o número de bactérias ligadas às células T84. Entretanto, a diminuição dos níveis de IL-8 também pode ser explicada por uma imunomodulação, via secreção de citocinas anti-inflamatórias, como a IL-10, mas essa hipótese não foi testada nesse trabalho. A presença das leveduras em células infectadas com Salm. Typhimurium 14028 também reduziu e/ou inibiu a fosforilação das MAPKs ERK1/2, p38 e JNK, mas não diminuiu a ligação do fator de transcrição para IL-8 (NF-κB) ao DNA, sugerindo que a diminuição dos níveis de IL-8 não foi devido à inibição do fator de transcrição para IL-8, mas, provavelmente, ao efeito das leveduras na inibição da MAPK p38, que é a proteína responsável pela estabilização do mRNA para IL-8. Uma outra explicação é o fato de as duas leveduras inibirem a MAPK JNK, uma vez que AP-1 (outro fator de transcrição para IL-8) é dependente da fosforilação dessa proteína. Finalmente, S. cerevisiae UFMG 905 e S. boulardii inibem, também, a ativação de mecanismos anti inflamatórios (a via PI3K/Akt) induzidos por Salm. Typhimurium 14028 em células T84. Concluindo, S. cerevisiae UFMG 905 e S. boulardii apresentaram um efeito protetor e modulador na função de barreira e na sinalização celular induzida em células T84 pela Salm. Typhimurium 14028.