Isolamento, propriedades bioquímicas e estudos biológicos do inibidor proteico da Macrotyloma axillare.
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Data de Publicação: | 2004 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFOP |
Texto Completo: | http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2655 |
Resumo: | Os extratos de sementes e cotilédones da Macrotyloma axillare tratados termicamente a 90OC por 30 min. seguido de precipitação por etanol frio na faixa de concentração de 60-80% resulta na purificação parcial de inibidores de protease do tipo Bowman Birk. O isolamento das isoformas com elevado teor de pureza é alcançado por meio de cromatografias de troca iônica. A análise dos cromatogramas em resinas carregadas demonstra uma redução da carga líquida negativa dos inibidores do cotilédone, confirmada pelo aumento dos tempos de retenção em HPLC e pela redução da massa molecular em espectrometria de massa. A maior potência dos inibidores do cotilédone em relação aos inibidores da semente em ensaios in vitro sugere uma possibilidade de envolvimento nos mecanismos de defesa da planta, embora ensaios comparativos “in vivo” não tenham sido realizados. A atividade dos inibidores Bowman Birk na prevenção de processos carcinogênicos induzidos está associada principalmente à sua atividade em inibir a quimotripsina. O processo de germinação de sementes da Macrotyloma axillare possibilitou a obtenção de isoformas pequenas, compreendidas entre as sete ligações dissulfeto dos inibidores BBI DE-3 e DE-4 já descritos por Joubert e cols. 1979, com atividade aumentada antiquimotripsina (oito vezes) e antitripsina (quatro vezes). |
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Oliveira, Marcelo EurípedesAndrade, Milton Hércules Guerra de2013-03-27T15:06:46Z2013-03-27T15:06:46Z2004OLIVEIRA, M. E. Isolamento, propriedades bioquímicas e estudos biológicos do inibidor proteico da Macrotyloma axillare. 2004. 103 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal de Ouro Preto, Ouro Preto, 2004.http://www.repositorio.ufop.br/handle/123456789/2655Os extratos de sementes e cotilédones da Macrotyloma axillare tratados termicamente a 90OC por 30 min. seguido de precipitação por etanol frio na faixa de concentração de 60-80% resulta na purificação parcial de inibidores de protease do tipo Bowman Birk. O isolamento das isoformas com elevado teor de pureza é alcançado por meio de cromatografias de troca iônica. A análise dos cromatogramas em resinas carregadas demonstra uma redução da carga líquida negativa dos inibidores do cotilédone, confirmada pelo aumento dos tempos de retenção em HPLC e pela redução da massa molecular em espectrometria de massa. A maior potência dos inibidores do cotilédone em relação aos inibidores da semente em ensaios in vitro sugere uma possibilidade de envolvimento nos mecanismos de defesa da planta, embora ensaios comparativos “in vivo” não tenham sido realizados. A atividade dos inibidores Bowman Birk na prevenção de processos carcinogênicos induzidos está associada principalmente à sua atividade em inibir a quimotripsina. O processo de germinação de sementes da Macrotyloma axillare possibilitou a obtenção de isoformas pequenas, compreendidas entre as sete ligações dissulfeto dos inibidores BBI DE-3 e DE-4 já descritos por Joubert e cols. 1979, com atividade aumentada antiquimotripsina (oito vezes) e antitripsina (quatro vezes).The extracts of seeds and cotilédones of Macrotyloma axillare heat treatments the 90ºC for 30 min. followed by precipitation for cold etanol to obtain saturation of 60-80% results in the partial purification of inhibitors of protease of the type Bowman Birk. The isolation of the isoinhibitors with high text of purity is reached by means of ionexchange chromatography. The analysis of the chromatography in loaded resins demonstrates a reduction of the load liquid negative of the inhibitors of the cotyledons, confirmed by the increase of the times of retention in HPLC and for the reduction of the molecular mass in mass espectrometria. The largest potency of the inhibitors of the cotyledons in relation to the dormant seed inhibitors in rehearsals in vitro suggests an involvement possibility in the mechanisms of defense of the plant, although rehearsals comparative in vivo they have not been accomplished. The activity of the inibidores Bowman Birk in the prevention of processes induced carcinogenesis is associated mainly to its activity in inhibiting the quimotrypsin. The process of germination of seeds of the Macrotyloma axillare facilitated the obtaining of small isoinhibitors, already understood among the seven disulfide linkages of the inibidores BBI DE-3 and DE-4 described by Joubert and cols. 1979, with activity increased antiquimotrypsin (eight times) and antitrypsin (four times).Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto.Macrotyloma axillareTenebrio molitorInibidores Bowman BirkBioquímicaIsolamento, propriedades bioquímicas e estudos biológicos do inibidor proteico da Macrotyloma axillare.Isolation, Bichemical properties and biological studies of proteic inhibitor of the Macrotyloma axillare.info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisporreponame:Repositório Institucional da UFOPinstname:Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)instacron:UFOPinfo:eu-repo/semantics/openAccessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/2655/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52ORIGINALDISSERTAÇÃO_IsolamentoPropriedadesBioquímicas.PDFDISSERTAÇÃO_IsolamentoPropriedadesBioquímicas.PDFapplication/pdf4001447http://www.repositorio.ufop.br/bitstream/123456789/2655/1/DISSERTA%c3%87%c3%83O_IsolamentoPropriedadesBioqu%c3%admicas.PDFee192d0212b04cb517f509491f182332MD51123456789/26552019-03-29 13:54:43.795oai:localhost: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Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.ufop.br/oai/requestrepositorio@ufop.edu.bropendoar:32332019-03-29T17:54:43Repositório Institucional da UFOP - Universidade Federal de Ouro Preto (UFOP)false |
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