Efeito do tratamento com extrato de Fasciola hepatica e cistatinas recombinantes de Fasciola hepatica em modelo de artrite induzida por antígeno

• Autor(a) principal: Rosa, Thales Hein da
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/202476
• topic: Artrite reumatóide; Cistatinas; Fasciola hepatica; Imunomodulacao; Rheumatoid arthritis; Cystatin; F. hepatica extract

A artrite reumatoide (AR) é uma doença autoimune sistêmica com subsequente destruição articular devido à inflamação crônica sinovial, o que leva a dor e incapacidade funcional. Apesar dos recentes progressos no tratamento da AR, ainda há limitações na eficácia e efeitos adversos importantes, ressaltando a necessidade de encontrar novas estratégias terapêuticas que diminuam esses efeitos adversos e retardem a evolução da doença. A Fasciola hepatica é um verme do Filo Platyhelminthes e quando presente em um organismo hospedeiro apresenta produtos secretores- excretores (ESPs) e antígenos de tegumento, os quais podem atuar como moduladores da resposta imune e inflamatória. Dentre esses produtos estão as cistatinas, moléculas inibidoras de cisteíno-protease. Estudos prévios com cistatinas provenientes de Schistosoma japonicum, mostraram o potencial terapêutico em modelos animais de colite e artrite. Dentro desse contexto, esse estudo teve como objetivo avaliar o efeito das cistatinas recombinantes 1 e 3 e do extrato de Fasciola hepatica sobre parâmetros de inflamação e nocicepção em modelo agudo de artrite induzida por antígeno (AIA). Camundongos Balb/c foram imunizados através de injeção subcutânea de 200 μL de uma emulsão contendo adjuvante de Freund e albumina bovina sérica metilada (mBSA) no dia 0. O reforço foi feito nos dias 7 e 14 utilizando o adjuvante incompleto de Freund. No 21° dia, os camundongos receberam uma injeção intra-articular de mBSA no joelho direito. Os animais foram divididos em grupos: veículo (tratado com PBS), extrato de Fasciola hepatica (200 μg), cistatina 1 (100μg e 150 μg), cistatina 3 (100μg e 150 μg), e receberam tratamento via intraperitoneal 24 horas e 30 minutos antes da injeção intra-articular. Houve avaliação de nocicepção utilizando um analgesimetro digital 0, 3h, 6h e 24h após a injeção intra-articular. Após 24 horas da injeção, os animais foram eutanasiados e foi realizado lavado articular para avaliação da migração celular através da contagem de leucócitos totais por câmara de Neubauer. Os dados foram analisados com o programa GraphPad Prism 6.0 através de ANOVA seguida de testes post-hoc entre os grupos. A significância estatística foi considerada quando p<0,05. O tratamento com 200 μg de extrato de F. hepatica reduziu 44% da migração de leucócitos para o joelho inflamado em comparação com o grupo veículo e foi capaz de reduzir a nocicepção celular nos tempos 3h, 6h e 24h após a injeção de mBSA (p<0,05). Já no tratamento com a cistatina recombinante, 100 μg de ambas cistatinas 1 e 3 reduziu a migração de leucócitos para o joelho inflamado em 40% (p<0,05) e 37% (p<0,001), respectivamente; porém não foi capaz de reduzir a nocicepção celular. O tratamento com a dose mais alta de ambas cistatinas (150 μ g) não foi capaz de alterar os parâmetros avaliados. Portanto, esses resultados destacam o potencial anti-inflamatório e analgésico do extrato, bem como o potencial anti-inflamatório das cistatinas recombinantes em modelo de AIA. Como perspectivas, está a avaliação do tratamento em modelo crônico de artrite, bem como o estudo do mecanismo de ação, focando em células importantes na patofisiologia da artrite reumatoide, como linfócitos e fibroblastos sinoviais.