OrfatrAb - Caracterização molecular do gene que codifica um ativador de transcrição da família LysR em Azospirillum brasilense

• Autor(a) principal: Campos, Samanta Bolzan de
• Data de Publicação: 2004
• Outros Autores: Schrank, Irene Silveira, Passaglia, Luciane Maria Pereira
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/23155
• topic: Azospirillum brasilense; Fixação biológica de nitrogênio; Biologia molecular; Biological nitrogen fixation; Diazotroph organisms; Atr genes; Azospirillum brasilense

O nitrogênio, elemento-chave na composição de diversas biomoléculas como aminoácidos e ácidos nucléicos, é abundante na atmosfera, onde, sob forma de N2, não está disponível para a maioria dos seres vivos. Entretanto, existem microrganismos, chamados de diazotróficos, que são capazes de converter o nitrogênio atmosférico em formas assimiláveis para os outros organismos, através do processo de Fixação Biológica do Nitrogênio. Bactérias do gênero Azospirillum são microrganismos diazotróficos de vida livre ou endofíticos, que se associam com gramíneas como trigo, arroz, cana-deaçúcar, entre outras. Uma das ferramentas mais utilizadas na identificação de genes envolvidos na fixação de nitrogênio em Azospirillum foi a mutagênese sítio-dirigida com o transposon Tn5. Essa metodologia possibilitou o isolamento de um transconjugante de A. brasilense, cuja capacidade de fixação de nitrogênio in vitro foi bastante elevada em relação à da linhagem de tipo selvagem. No local de inserção do transposon no DNA desse transconjugante foram encontradas duas fases abertas de leitura, orfartAb e orf281, tendo sido, essa última, interrompida pelo Tn5. O objetivo deste trabalho foi determinar a seqüência de nucleotídeos de orfatrAb, e, a partir desta, a seqüência de aminoácidos, a qual apresentou grande similaridade, principalmente em sua região amino-terminal, com proteínas da família de ativadores de transcrição LysR. ORFatrAb possui 297 resíduos, peso molecular de 33.581,6 kDa, ponto isoelétrico de 7,26 e índice de instabilidade de 33,29. Na região reguladora de orfatrAb foram identificados elementos de seqüência consensuais para a ligação de proteínas ativadoras de genes envolvidos no metabolismo e na fixação biológica do nitrogênio. Palavras-chave: fixação biológica do nitrogênio, organismos diazotróficos, genes atr, Azospirillum brasilense.