Otimização da produção de Cordyceps militaris em meio a base de melaço de cana e quantificação de compostos bioativos

• Autor(a) principal: Cerri, Maria Luísa
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/25050
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Antioxidantes; Fenóis; Cogumelos; Micélio; Cromatografia a líquido de alta eficiência; Antioxidants; Phenols; Mushrooms; Mycelium; High performance liquid chromatography; Biotecnologia

O Cordyceps militaris é um fungo de crescente interesse popular e científico por sua complexa composição bioativa que lhe confere funções de relevância farmacológica. É composto por moléculas como ergosterol, manitol, adenosina, cordicepina e exopolissacarídeos. Essas moléculas bioativas são tradicionalmente produzidas a partir da frutificação do Cordyceps militaris, um processo longo e trabalhoso que sofre impacto da perda de produtividade em um curto espaço de tempo. Compostos bioativos estão também presentes no micélio deste fungo, mas em menor concentração, porém a produção de micélio permite fácil escalonamento e pode ser vantajoso para a produção em larga escala. Este trabalho propõe a utilização do melaço (subproduto da indústria açucareira) como principal fonte de carbono para a produção de micélio de Cordyceps militaris. A otimização do meio de cultivo se deu a partir da análise estatística de arranjo composto central (CCD) e o meio otimizado determinado foi capaz de produzir 25,1 g.L-1 de biomassa. Ensaios com a adição de azeite e sulfato de magnésio foram realizados para testar sua eficácia na produção de compostos bioativos. Para avaliação de compostos fenólicos e atividade antioxidante foram utilizados os métodos de Folin-ciocalteau e DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazil), respectivamente. Ademais foram realizadas análises iniciais em cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado a espectrometria de massas (LC/MS-MS), com objetivo de identificar possíveis massas nos extratos, comparar e otimizar métodos de extração visando a melhor detecção de cordicepina. O extrato produzido a partir do meio líquido apresentou concentrações mais elevadas de compostos fenólicos e atividade antioxidante em relação ao extrato micelial. A produção de compostos fenólicos em 60 dias em meio otimizado é 50% maior que em 10 dias. Em comparação ao meio de manutenção o meio otimizado tem 14% mais compostos fenólicos (ambos com 60 dias de cultivo). Para o DPPH, o melhor resultado foi do extrato do meio líquido otimizado com EC50 de 9,98 ml/L. Em relação às extrações, o melhor método se mostrou ser 15 partições com acetato de etila, por ser mais seletivo à cordicepina, composto de maior interesse, e diminuir a presença de outros compostos que atrapalham sua determinação e podem acarretar em entupimento da coluna. O uso do melaço como fonte de carbono para C. militaris foi validado neste estudo, assim como sua concentração ideal e a produção ampliada de compostos fenólicos em detrimento ao meio de manutenção.